Одним из принципиальных вопросов разработки новых видов биологически активной продукции из левзеи является изучение биологически активного действия на моделях различных биологических систем.
Без проработки этого вопроса затруднено целенаправленное продвижение инновации с новым видом сырья, его стандартизация и получение из него высокоэффективного активного препарата целевого назначения.
В ранних работах нами была показана возможность использования модели in vitro для первичной оценки биологической активности как исходных растительных субстанций, так и функциональных продуктов на их основе. Эта скрининговая модель ранее была использована нами для растительных объектов – топинамбура, амаранта. В этой модели для тестирования образцов in vitro использовали критерий изменения функциональных свойств (проявление пролиферативного ответа как спонтанного, так и под влиянием Т- и В-митогенов) Т- и В- клеток иммунной системы.
Для определения биологической активности водных экстрактов образцов из листьевой части левзеи сафлоровидной проведено тестирование образцов in vitro на функциональные свойства Т и В- клеток иммунной системы с контролями по идентичным составам продуктов-плацебо т.е. тестирование. на проявление пролиферативного ответа (спонтанного и под влиянием Т- и В-митогенов).
Для оценки влияния препаратов целесообразно использовать относительные показатели пролиферации, для чего абсолютные показатели пролиферации, полученные под влиянием различных доз (разведений) препаратов, относили к соответствующим показателям контрольных образцов культур клеток для случая спонтанной пролиферации.
Ранее нами было показано, что водные экстракты из соцветий, корней и листьевой чати левзеи оказывают выраженное действие на лимфоциты в диапазоне разведений исходных водных экстрактов от 1: 20 до 1: 1000. Причем, соцветия левзеи практически не оказывали ингибирующего действия на пролиферацию клеток как спонтанную, так и митоген-индуцированную.
Начиная с разведения 5х10-2 начинается ингибирование пролиферации клеток наиболее существенное при 100-кратном разведении и ниже. В данной работе исследовано действие водных экстрактов листьевой части левзеи с 8-ми и 10-ти летних плантаций Северо-Востока Европейской части России (Архангельская обл.) с использованием их разведений от 1:100 до 109 -крат. Полученные в скрининговом эксперименте данные приведены в таблице.
Диапазон испытуемых разведений водных экстрактов надземной части левзеи сафлоровидной не превышал 10-9 с максимальной дозой 10-2. Образцы листьев начальной стадии вегетации в диапазоне разведений менее 109 проявляют тенденцию незначительного ингибирования спонтанной пролиферации. Образцы из листьев в фазе бутонизации в разведении 10-7 проявляют стимулирующий эффект при спонтанной пролиферации и только при разведениях менее 103 наблюдается тенденция ингибирования.
Таким образом, для проявления эффекта водными экстрактами при спонтанной пролиферации, возможно, существенное значение имеет фаза развития растения. Для образцов из листьев фазы бутонизации наблюдается сходная стимуляция спонтанной пролиферации клеток в диапазоне концентрации 10-7 и только при разведениях менее 10-3 наблюдается ингибирование пролиферации клеток.
Для образца фазы бутонизации не наблюдается зависимости стимуляции пролиферации Т- и В-клеток в испытуемом диапазоне разведений, а явное ингибирование пролиферации клеток наблюдается только при разведении 10-2.
Проведенные исследования показывают всю важность первичного скрининга исходного сырья на проявление биологической активности как одну из стадий поиска источников лекарственных, биологически активных средств природного происхождения и решения вопросов стандартизации сырья.